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血管活性肽酶抑制劑(VPI)檢測試劑盒操作步驟

點擊次數(shù):1080 更新時間:2022-03-01

血管活性肽酶抑制劑(VPI)檢測試劑盒操作步驟:

實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl標(biāo)記抗體加99μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。

3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。

5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。

轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體

內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗體

細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1抗體

外胚層發(fā)育不良抗體

E2 tag標(biāo)簽抗體

鐵螯合酶抗體

DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體

上皮細(xì)胞粘附分子抗體

表皮生長因子抗體

表皮生長因子受體3抗體

上皮鈣粘附分子抗體

紅細(xì)胞生成素受體抗體

腦啡肽抗體

EID2蛋白抗體

上皮細(xì)胞粘附分子抗體

紅細(xì)胞膜相關(guān)蛋白ERMAP抗體

腺樣癌特異性相關(guān)抗原抗體EMC1抗體

腺樣癌特異性相關(guān)抗原抗體EMC1抗體

染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1抗體


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